中國表示「公然殺害主權國家領導人」是不可接受的，而南非則質疑所謂的「先發制人」正當理由。
美國與以色列對伊朗的戰爭在全球南方多數國家被譴責為非法，中國稱此舉不可接受，因為「公然殺害主權國家領導人」違反國際規範。
許多國家反對美國與伊朗就核計劃與導彈能力的談判未獲充分機會便遭到華盛頓與以色列的轟炸，分析人士多將此戰視為殖民主義式的武力行使。
巴基斯坦總理謝赫巴茲·謝里夫對伊朗最高領袖阿亞圖拉·哈梅內伊被殺表達哀悼，指出國際法禁止針對國家元首。南非總統西里爾·拉馬福薩質疑戰爭的「先發制人」理由，強調自衛僅限於武裝入侵後的回應，且「根本政治問題無法以軍事手段解決」。
巴西表示深切關切，並補充說「攻擊發生於雙方談判過程中，而談判是唯一可行的和平途徑」。
土耳其總統雷傑普·塔伊普·埃爾多安譴責這些攻擊，稱其為以色列總理本傑明·內塔尼亞胡「煽動」的結果。阿曼外交部長巴德爾·阿爾布薩伊迪曾在攻擊前夕表示協議即將達成，他呼籲美國「不要再深陷其中，這不是你們的戰爭」。阿曼擊落兩架無人機，另有一架於週二在薩拉拉港附近墜毀，據國家媒體報導。
古巴政權在川普壓力下表示：「美國與以色列再次威脅並嚴重危害地區及國際和平、穩定與安全。」馬來西亞譴責攻擊，強調「爭端必須透過對話與外交解決」。
印尼是少數宣布派遣部隊參與川普和平委員會計劃中的加沙國際安全部隊的國家之一，對伊朗談判失敗表示「深切遺憾」，其總統提出願意前往德黑蘭重啟對話。印尼烏萊瑪理事會，該國穆斯林神職人員組織，呼籲政府抗議並退出和平委員會。
許多其他發展中國家也譴責伊朗對波斯灣鄰國的攻擊。
分析人士指出，這場衝突應置於過去伊拉克與利比亞政權更迭戰爭、以色列自2023年以來在加沙的戰爭免責，以及殖民主義的背景下理解，並提及美國國務卿馬可·魯比奧上月的演講，他似乎美化西方過去對發展中國家的征服。
約翰內斯堡大學政治學教授西帕曼德拉·宗迪表示，西方視戰爭具有道德目的，而全球南方則認為衝突是邪惡且是未成熟行為的失敗。他指出，美國與以色列透過亞伯拉罕協議誘使部分國家承認以色列，並對其他國家使用武力。
「這是一場支配與屈從的戰爭，因此帶有帝國主義的底色與動機，」宗迪說。「這讓世界對我們所有人都變得不安全。」
評論者指出，歐洲在川普試圖吞併格陵蘭時強烈捍衛國際法，但對這場戰爭則態度冷淡，顯示雙重標準。
《曾經與未來的全球秩序》作者阿米塔夫·阿查里亞表示，過去美國尋求影響力與合法性，現在則完全透過脅迫行事，儘管中國軟實力崛起，向發展中國家提供投資。他說俄羅斯也將受益，因為伊朗及其他川普外交政策衝擊分散了對烏克蘭的注意力。
「全球南方許多國家將尋求一個能對抗美國的多國聯盟，因為美國被視為極具侵略性與帝國主義，」阿查里亞說。
部分評論者強調，批評戰爭不代表支持伊朗政權。
智利前外交部長赫拉爾多·穆尼奧斯說：「我譴責伊朗神權政權的獨裁與壓迫性質，但這些持續的攻擊違反國際法。其動機更多是美國國內政治因素，由一位因成功軍事撤離委內瑞拉馬杜羅而感到有權力的美國總統所為。」
分析人士指出，川普政府既未尋求聯合國安全理事會批准——如同2003年伊拉克戰爭時所嘗試——也未獲得國內民選代表的同意。
聖保羅基金會國際關係教授奧利弗·斯圖恩克爾表示，拉丁美洲擔憂川普因在委內瑞拉與伊朗的行動而變得更加大膽，可能會將目標轉向古巴。
「國際法正被更系統性地侵蝕，這對許多軍事薄弱且資源豐富、長期依賴國際規則與規範的全球南方國家有深遠影響，」斯圖恩克爾說。
巴基斯坦前駐美大使馬利哈·洛迪表示，美國與伊朗的談判是假意的，去年亦是如此，利用談判作為攻擊的煙幕。
「現在誰還能信任川普政府？它單方面行事，完全無視國際法與外交規範，」洛迪說。「這將成為他們的惡夢。」