CCHFV 聚合酶的 RNA 合成與核苷酸類似物抑制機制

Nairoviridae 病毒科約 4000 個殘基的 L 蛋白是已知最大的病毒聚合酶，缺乏全面的結構資訊，但有望開發核苷酸類似物 (NA) 抑制劑。本文報導了全長的 Nairoviridae 克里米亞-剛果出血熱病毒 (CCHFV) L 蛋白結構，包括一個 3.0 Å 解析度的聚合酶延伸複合物，闡明了早期和晚期延伸階段的機制。在 CCHFV L 蛋白的核酸內切酶、RNA 依賴性 RNA 聚合酶 (RdRP) 和帽結合域這三個主要功能區域中，均發現了大規模的添加和插入，延伸了 RdRP 活性位點兩側的 RNA 結合路徑，並形成了病毒複製的關鍵相互作用網絡，這與 CCHFV 小基因組檢測數據的結果一致。研究發現，具有與健那素 C 藥物索磷布韋 (sofosbuvir) 相同的核糖 2'-修飾的核苷酸類似物 (NA) 能透過立即鏈終止機制，特異且有效地抑制 CCHFV RdRP。以索磷布韋-C 型肝炎病毒 RdRP 系統為參考，在存在相應 NTP 的競爭性檢測中，進一步證明了這些 NA 的效力。